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培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有水、氮源、無機(jī)鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì),因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長時(shí)間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長期保管,均改制成粉末。培養(yǎng)...
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細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。(由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系),因此,細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞(特定環(huán)境下口語和書面語都使用),廣義是指可傳代的細(xì)胞。經(jīng)過40-50次分裂的渡過第二次死亡危機(jī)的細(xì)胞,稱之為細(xì)胞系。如細(xì)胞系的生存期有限,則稱之為有限細(xì)胞系;已獲無限繁殖能力的細(xì)胞系,稱連續(xù)或無限細(xì)胞系。無限細(xì)胞系大多已發(fā)生異倍化,具異倍體核型,可能成為惡性細(xì)胞,因此本質(zhì)上已是發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系。無限細(xì)胞系有永...
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NK細(xì)胞分型標(biāo)志物自然殺傷細(xì)胞(Naturalkiller,NK)是細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞的一種類型,是天然免疫系統(tǒng)的主要組成部分。NK細(xì)胞在腫瘤和病毒感染細(xì)胞的宿主排斥反應(yīng)中起重要作用。它們之所以被命名為“Naturalkiller”,是因?yàn)槌跽J(rèn)為它們不需要激活就能殺死“缺失自我識別”的細(xì)胞(“缺失自我識別”是用來描述MHC-I類細(xì)胞表面標(biāo)記表達(dá)水平較低的細(xì)胞,這種情況可能是由病毒感染引起的,或者是在殺傷T細(xì)胞的強(qiáng)選擇壓力下發(fā)生的)。NK細(xì)胞與ILC1s(1型天然淋巴細(xì)胞)具有許...
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細(xì)胞系作為正?;蚰[瘤組織的模式細(xì)胞被廣泛應(yīng)用于科學(xué)研究和藥物開發(fā),然而很大一部分的細(xì)胞系被錯(cuò)誤標(biāo)記或被其它個(gè)體、組織、種系來源的細(xì)胞所替代。當(dāng)一個(gè)細(xì)胞系建成后,中國常通過組織專家開鑒定會的形式予以鑒定,從學(xué)術(shù)角度考慮,此舉實(shí)非必要。按慣例,只要研究認(rèn)真負(fù)責(zé)地把有關(guān)資料在雜志或刊物上報(bào)道,詳細(xì)介紹上述各項(xiàng)目即可。以前因未建立統(tǒng)一的細(xì)胞庫時(shí),對已建立的細(xì)胞系多由作者單位自行保管,有浪費(fèi)人力、交流使用不便、細(xì)胞易污染和丟失等弊病。我國已初建成小規(guī)模貯存細(xì)胞機(jī)構(gòu),待獲進(jìn)一步發(fā)展,這對...
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重組蛋白其獲得途徑可以分為體外方法和體內(nèi)方法。兩種方法的前提都是應(yīng)用基因重組技術(shù),獲得連接有可以翻譯成目的蛋白的基因片段的重組載體,之后將其轉(zhuǎn)入可以表達(dá)目的蛋白的宿主細(xì)胞從而表達(dá)特定的重組蛋白分子。當(dāng)前重組蛋白的生產(chǎn)主要有四大系統(tǒng);1.原核表達(dá)系統(tǒng):常用的大腸桿菌蛋白表達(dá),真核表達(dá)系統(tǒng)如酵母,哺乳動物細(xì)胞蛋白表達(dá)(常用的細(xì)胞CHO,HEK293)及、昆蟲細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)。重組蛋白的產(chǎn)生尚可利用轉(zhuǎn)基因動物的乳腺或者植物產(chǎn)生,產(chǎn)生的重組蛋白作為生物制藥的產(chǎn)物,在醫(yī)學(xué)中作用顯著。利...
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菌種的有效保存用于發(fā)酵過程作為活細(xì)胞催化劑的微生物,包括細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌四大類。來源于自然界大量的微生物,從中經(jīng)分離并篩選出有用菌種,再加以改良,貯存待用于生產(chǎn)。使優(yōu)良菌種的性狀保持穩(wěn)定,人為地創(chuàng)造條件,使菌種的新陳代謝活動處于不活潑狀態(tài),即選取優(yōu)良菌種的休眠體(孢子或芽孢)或富有生命力的懸浮液在低溫或脫水狀態(tài)下保存。脫水存法1.沙土保存法,能產(chǎn)孢子的細(xì)菌、放線菌及霉菌可采用此法保存,即將沙和土以3:2比例混合,經(jīng)稀酸處理洗凈過篩,裝入小試管內(nèi),裝置高度為1cm;滅...
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重組蛋白的產(chǎn)品介紹重組蛋白的產(chǎn)生是應(yīng)用了重組DNA或重組RNA的技術(shù)從而獲得的蛋白質(zhì)。體外重組蛋白的生產(chǎn)主要包括四大系統(tǒng):原核蛋白表達(dá),哺乳動物細(xì)胞蛋白表達(dá),酵母蛋白表達(dá)及昆蟲細(xì)胞蛋白表達(dá)。生產(chǎn)的蛋白在活性和應(yīng)用方法方面均有所不同。根據(jù)自身的下游運(yùn)用選擇合適的蛋白表達(dá)系統(tǒng),提高表達(dá)成功率。以利用轉(zhuǎn)基因動物的乳腺表達(dá)重組蛋白為例:其方法是將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起,通過顯微注射等方法,導(dǎo)入哺乳動物(哺乳動物才會泌乳)的受精卵中,然后,將受精卵送入母...
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細(xì)胞培養(yǎng)基的基本介紹合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的種類相當(dāng)多。合成培養(yǎng)基成分已知,便于對實(shí)驗(yàn)條件的控制。但與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學(xué)成分所替代,因此,細(xì)胞培養(yǎng)中使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。動物血清成分復(fù)雜,各種生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚。血清對細(xì)胞生長很有效,但后期對培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測造會成一定困難。另外高質(zhì)量的動物血清來源有限,成本高,限制了它的大...
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